除了两位水管工兄弟,游戏中的经典角色也在电影中亮相。碧姬公主作为蘑菇王国意志坚定的统治者,在片中对马力欧进行了严酷的作战训练,以帮助后者挖掘自身潜力。喜剧演员杰克·布莱克、塞斯·罗根则为片中的大反派酷霸,以及“搞笑担当”大猩猩咚奇刚配音。值得一提的还有,为游戏中的马力欧和路易吉兄弟配音长达三十余年的查尔斯·马丁内斯,也在片中友情客串。电影中的帕特里克和科尔姆有着截然不同的性格和爱好,一个喜欢吹牛皮,另一个爱好小提琴。然而这种差异并不影响两人几十年的友谊,直到有一天“某件事情”的发生,导致两人的牢不可破的友谊突然崩塌。而看懂这个所谓的“某件事情”,正是这部电影让人感到有意思的地方。
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